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小鼠ELISA試劑盒進(jìn)行實(shí)驗時(shí)需要注意什么呢?
2023-09-26產(chǎn)品展示/ Product display
小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類(lèi)型,不需要任何分離步驟,操作十分簡(jiǎn)便、快速,數分鐘便能得出結果,酶免疫測定方法操作時(shí),所有反應試劑均在同一體系內進(jìn)行。
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小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒
品牌:佰利萊
貨號:BLL-X12129A
規格:96t/48t
本產(chǎn)品適用于科研實(shí)驗不適用于臨床.
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中的含量。
樣本:血清,血漿,組織液,組織勻漿等
上海佰利萊生物科技有限公司主營(yíng)elisa試劑盒、elisa試劑、培養基、血清、抗體、蛋白酶、多肽
1.原理:免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結合原理,對待測抗體或者抗原進(jìn)行分析測定的方法,酶聯(lián)免疫吸附分析(下稱(chēng)ELISA)是免疫分析的一種,分三個(gè)部分組成:免疫識別,信號輸出和數據處理。
2.步驟:免疫識別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體,而后利用抗體識別待測的抗原(通常是疾病的蛋白質(zhì)生物標記物,病毒,細菌等等,從復雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著(zhù)用帶有辣根過(guò)氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)、熒光或放射性標記的抗體通過(guò)直接或者間接的方式輸出識別信號。最后利用信號強度,標準樣品濃度梯度等信息計算得出待測樣中目標抗原的濃度。
3.分類(lèi):根據免疫識別和信號輸出方式的不同,ELISA可以分為雙抗體夾心法、直接免疫競爭法和非直接免疫競爭法等等。其中雙抗體夾心法在商業(yè)應用上最常見(jiàn)。
小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒注意事項:
1.所有的操作過(guò)程一般都用排槍處理,在操作過(guò)程中,排槍吸兩檔打一檔,會(huì )防止氣泡的產(chǎn)生,并且操作時(shí)一定要保證槍頭每步都要插緊,選擇配套的槍頭尤為重要,槍頭容易掉,影響實(shí)驗效果,此外每一步都要看好槍頭的頁(yè)面要平齊,避免槍頭松動(dòng)自己卻不知。
2.在處理稀釋標準品的過(guò)程中,要在渦旋儀上點(diǎn)一下,使混勻,但振蕩過(guò)程不宜過(guò)長(cháng),防止出現蛋白質(zhì)降解變性的現象
3.二抗的稀釋濃度對顯色效果起著(zhù)至關(guān)重要的作用,每次選用新的二抗或在-80度冰箱拿分裝好的二抗最好是每一次都做一個(gè)預實(shí)驗,設置不同的二抗濃度和顯色時(shí)間,從而確定相應的條件,方可做好大規模的篩選細胞工作。
4.同種細胞株的ELISA孵育時(shí)間要保持一致,降低無(wú)關(guān)變量的影響。
5.各種抗體的保存最好是在-80度冰箱,一定要將降低凍融次數,蛋白比較敏感,凍融次數多,蛋白活性就會(huì )降低。
6.稀釋樣品時(shí)一定要保證混勻,槍尖在液面以下吹打相同的次數,可防止出現氣泡。
7.分析數據的過(guò)程中,一般至少要5個(gè)點(diǎn),不然數據沒(méi)有相應的說(shuō)服力。
8.96孔板取完樣品后,蓋好,提早加好DPBS稀釋液,防止時(shí)間過(guò)長(cháng),樣品揮發(fā),濃度不準。
免責聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗或人體實(shí)驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗者承擔,本公司概不負責。
2. 嚴格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗者承擔。
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