大鼠ELISA試劑盒的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過(guò)反應而結合在固相載體上。
此時(shí)固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
大鼠ELISA試劑盒選購后需注意哪些：
1.檢查檢查說(shuō)明書(shū)、包裝盒的質(zhì)量，通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本，印刷的質(zhì)量會(huì )比較差。其次仔細閱讀說(shuō)明書(shū)，如上所示查找ELISA的性能指標。
2.實(shí)驗
(1)利用干擾實(shí)驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液；b. 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體；c. 后續操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，加檢測抗體、酶復合物和底物；d. 實(shí)驗完畢后，檢測其標準曲線(xiàn)，如果標準曲線(xiàn)良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為假貨ELISA試劑盒；e. 如果標準曲線(xiàn)無(wú)線(xiàn)性，則說(shuō)明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
(2)如果購買(mǎi)了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實(shí)驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假a. 取出購買(mǎi)的試劑盒A的包被板兩條；b. 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線(xiàn)；c. 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線(xiàn)；d. 后續操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，加檢測抗體、酶復合物和底物；e. 實(shí)驗完畢后，檢測兩條標準曲線(xiàn)，如果兩條標準曲線(xiàn)一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的同一個(gè)指標而非A和B，即該試劑盒為假貨ELISA試劑盒；f. 如果兩條標準曲線(xiàn)不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測的不同指標，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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更新時(shí)間：2023-03-28 
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