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技術(shù)文章/ Technical Articles

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  • 2024

    6-14

    ELISA酶聯(lián)免疫吸附試驗的標準程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(captureAb)固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體(primarydetectionAb),形成一個(gè)抗原抗體的復合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標記了,即可用來(lái)直接測定抗原的量,若無(wú),則可利用另一個(gè)酶標記的二級抗體來(lái)測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate),作用后產(chǎn)生出現的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系,依此原理計算出樣本中的抗原總量...

  • 2024

    6-14

    佰利萊生物為您講解PCR反應效率低值解析反應效率視為實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析設計和優(yōu)化的關(guān)鍵因素。利用標準曲線(xiàn)(通過(guò)對目標模板進(jìn)行連續梯度稀釋獲得)獲取效率值。該效率值可作為總反應的“健康”標志。低效率與高效率所造成的影響有所不同。改善上述兩種情形的步驟則相差甚遠。理想的反應效率為100%,但反應效率在90–110%范圍內都是可以接受的。確定某個(gè)特定的分析效率是否低下的方法是稀釋模板生成標準曲線(xiàn)(模板稀釋的范圍應涵蓋所有未知樣本),然后查看該范圍內的效率。它應盡可能接近100%...

  • 2024

    6-14

    ELISA檢測試劑盒試驗溫育解讀在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加酶結合物和顯色劑后??乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱(chēng)為溫育(incubation),有人稱(chēng)之為孵育。溫育的時(shí)間選擇:溫育這一步是ELISA測定中最容易出現問(wèn)題的步驟。目前國內ELISA試劑盒的反應溫育時(shí)間為37℃30分鐘-1小時(shí),進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃1-2小時(shí)才能有較wan全的結合,低于1小時(shí),可能會(huì )影響測定下限。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表...

  • 2024

    5-30

    ELISA試劑盒結果判定:1、結果的判定嚴格依據試劑盒提供的陽(yáng)性判定值(CO)進(jìn)行結果判定。廠(chǎng)商提供試劑的同時(shí),說(shuō)明書(shū)上列出的CO值是建立在一系列科學(xué)試驗及統計研究的基礎上,不應隨意更改。定量測定需要制備標準曲線(xiàn),根據標準曲線(xiàn)計算結果。2、灰區的設置通常情況下ELISA結果報告方式為“陰性"或“陽(yáng)性",在二者之間有一條明確的分界線(xiàn),也就是所謂的陽(yáng)性判定值即CO值,對于樣本的吸光度值(A)高于CO值就判斷為陽(yáng)性,相反則判斷為陰性,然而在實(shí)際工作中經(jīng)常會(huì )出現樣本A值位于CO值附近...

  • 2024

    5-20

    細胞是生命的基本單位。(除了病毒外。)細胞由細胞核組成和細胞膜還有線(xiàn)粒體等組成。(除個(gè)別生物)小到細菌大至鯨魚(yú)。都由細胞組成。細胞培養實(shí)用技巧總括:1.買(mǎi)細胞要去正規的地方購買(mǎi),一般產(chǎn)品資料上面會(huì )有針對細胞的詳細介紹,這樣在培養之前可以了解細胞正常生長(cháng)的狀態(tài)圖、傳代、培養基的類(lèi)型等。2.不管是買(mǎi)的細胞,還是他人惠贈的細胞,剛拿到手需要趕緊做的兩件事:一檢測是否有支原體污染;二迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第二天更換一次培養基。3.發(fā)現細胞有污染迅速處理掉,特別是當養了很多種細胞...

  • 2024

    5-17

    化學(xué)滅菌法系指利用化學(xué)藥品的氣體或產(chǎn)生的蒸汽進(jìn)行殺滅微生物的方法。同一種化學(xué)藥品的低濃度時(shí)呈現抑菌作用,而在高濃度時(shí)則能起殺菌作用。其殺菌機理可能是:能使微生物蛋白質(zhì)變性死亡,或與酶系統結合影響代謝,或改變膜壁通透性使微生物死亡等?;瘜W(xué)氣體滅菌法可分為三種:臭氧消毒法、甲醛等蒸汽熏蒸法、環(huán)氧乙烷滅菌法。下面詳解三種化學(xué)氣體滅菌法:1.臭氧消毒法臭氧(O3)的消毒原理是:臭氧在常溫、常壓下分子結構不穩定,很快自行分解成氧(O2)和單個(gè)氧原子(O),后者具有很強的活性,對細菌有強...

  • 2024

    5-15

    抗體是什么:抗體是哺乳動(dòng)物適應性免疫系統對抗病原體的核心,它是在病原體刺激下由漿細胞(效應B細胞)所分泌的一種免疫球蛋白,能夠識別并結合特異的病原體抗原,隨后通過(guò)介導中和作用、調理作用、效應T細胞殺傷等來(lái)清除病原體。隨著(zhù)抗體制備與改造技術(shù)的飛速發(fā)展,抗體已經(jīng)廣泛應用于生命科學(xué)各個(gè)領(lǐng)域,包括科學(xué)研究、診斷、治療等??贵w的制備歷史和工藝決定了抗體的質(zhì)量和類(lèi)型??贵w制備工藝可分為三個(gè)階段:傳統方法免疫動(dòng)物獲得抗體、應用雜交瘤技術(shù)制備抗體和基因工程技術(shù)制備抗體。具體如下:1、傳統方法...

  • 2024

    5-8

    細胞凋亡(apoptosis)指為維持內環(huán)境穩定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同,細胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程,而是主動(dòng)過(guò)程,它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用,它并不是病理條件下,自體損傷的一種現象,而是為更好地適應生存環(huán)境而主動(dòng)爭取的一種死亡過(guò)程。壞死(necrosis):壞死是細胞受到強烈理化或生物因素作用引起細胞無(wú)序變化的死亡過(guò)程。表現為細胞脹大,胞膜破裂,細胞內容物外溢,核變化較慢,DNA降解不充分,引起局部嚴重的炎癥反應。細胞凋亡...

  • 2024

    5-8

    血液生化指標的分析及激素等含量的測定對臨床判斷、預測藥物毒性作用及疾病的發(fā)生發(fā)展有著(zhù)重要的意義。那么,血清、血漿、全血有何區別,各自的用途是什么呢?1、常見(jiàn)的血液生化指標與激素有以下幾種:常見(jiàn)的血液生化指標:血糖(GLU)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、膽gu醇(CHO)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽hong素(TBIL)、鎂、鈣等。常見(jiàn)的激素:睪酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨...

  • 2024

    5-7

    本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫學(xué)診斷人(Human)白三烯B4(LTB4)ELISA檢測試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被白三烯B4(LTB4)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并che底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白三烯B4(LTB4)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值)...

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